Büyük İskender’in MÖ.334 tarihinde doğuya yaptığı sefer sonucunda Anadolu’da Pers egemenliği sona ermiştir. Büyük İskender’in çıktığı doğu seferi ile Helenistik Dönem başlamıştır. Bolu ve civarı Büyük İskender’in gücünden çok fazla etkilenmemiştir. Büyük İskender’e ve onun ölümünden sonra imparatorluğunu paylaşan komutanlarına bağlı olmamıştır. Bu dönemde Bolu ve çevresinde Bithynia Devletinin egemenliği vardır.